最近發現，藥物的配制、細胞幹預加藥量的計算等，對於一些新手朋友們還是略有難度。本著送佛送到西的原則，我們還是稍微聊一下這個也不是特別復雜的數學問題吧。

我們在拿到一個新的藥品之後，首先要關註的應該是藥物的理化性質、溶解性和配制方法。其次，是藥物的細胞毒有無其他文獻摸索過，該藥物在其他文獻中的使用劑量是多少的數量級，作用時間是多久。

我們以perifosine，一種新型Akt抑制劑為例進行說明。

藥品鏈接：Perifosine (KRX-0401) | 購買Akt 抑制劑 - Selleck

如下圖所示（圖片內容可至藥品官網查看），首先我們要關註藥品的理化性質和溶解度。根據藥品說明可見，perifosine的水溶性還是很好的，因此我們直接使用PBS溶解即可。

我們通常不使用水作為藥品溶劑，因為滲透壓的影響，水本身具有細胞毒性；乙醇也不是我們常用的溶劑，因為其不僅有細胞毒，且對於特殊藥品的溶解，乙醇又遠不如DMSO好用；DMSO是我們常用的藥品溶劑，但不適用於perifosine，因為說明書提示瞭DMSO下不溶。

所以，有朋友要問瞭，D-Hanks能用來配藥嗎？生理鹽水呢？小編不推薦使用D-Hanks配藥，因為D-Hanks中的糖成分，可能會縮短配制好的藥品的保質期。生理鹽水確實是可以用來配藥，隻不過，對於細胞實驗室來說，PBS的獲得比生理鹽水更為容易，所以，何苦舍近求遠呢。

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當我們確定瞭用PBS配藥之後，下一步就是要關註儲備液的濃度瞭。產品說明書給定瞭不同濃度的儲備液的配法，十分貼心。一般來說，儲備液的濃度是越高越好，儲備液的濃度越高，藥品越不容易在儲存過程中變性失效。但是，考慮到為瞭後期加藥、配藥方便，我們還是會推薦使用10的單位作為常用的儲備液濃度。

如下圖所示，我們推薦使用10mM作為我們的儲備液濃度。這裡註意瞭，就算產品說明書沒有推薦儲備液的濃度，10mM和1mM仍然是我們最最常用的兩種儲備液的濃度選擇。那還有新人朋友會問瞭，這個大寫的M是啥意思。嗯，“M”就是“mol/L”。

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推薦使用10mM的理由為：通常細胞實驗用的藥品幹預終濃度多為微(μ)、納(n)、皮(p)這一級別的。毫(m)已經是十分巨大的單位瞭。10mM這個濃度，能夠兼顧計算方便，同時保有瞭藥品儲備液應有的高濃度。

如下圖，這份說明書仍然貼心的把相關實驗都貼出來瞭。如果產品說明書沒有這麼詳細的數據示例，相關的信息我們則需要通過文獻檢索進行獲得。

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我們看到，通常的細胞幹預的單位在10μM附近，那麼我們用10μM這個濃度作為幹預終濃度進行計算。

1.配制儲備液（分裝，儲存於-80℃長期保存，避免反復凍融）：

儲備液：10mM = 10mmol/L = 10μmol/ml = 10nmol/μL

2.配制應用液（取儲備液，稀釋至應用液濃度，儲存於4℃，保存3-7天，但建議盡快使用。應用液濃度通常為幹預濃度的100倍）

應用液：1000μM = 1000μmol/L = 1μmol/ml = 1nmol/μL

3.幹預終濃度：10μM = 10μmol/L = 10nmol/ml = 10pmol/μL

現已知，每瓶細胞培養體系為3ml，藥品幹預的終濃度為10nmol/ml 。那麼，每瓶細胞的加藥的物質的量（mol）是多少呢？

藥品的物質的量 = 3ml×10nmol/ml = 30nmol。

那麼，為瞭加入30nmol的藥品，需要加多少體積（μL）的應用液呢？

藥品應用液的體積 = 30nmol ÷ (1nmol/μL) = 30μL

所以，在配制好應用液後，我們隻需要簡單地向每瓶細胞中加入30μL的應用液，即可完成加藥。是不是大大簡化瞭加藥的計算過程。這時候又有同學要問瞭，直接補入的30μL導致的總液體體積變化有影響嗎？小編認為，1%的體積誤差並不重要。但不一定對，仁者見仁智者見智，朋友們也可以先抽出30μL的液體，再補入30μL的藥品。科研嘛，嚴謹一些總沒錯。

配藥與簡單加藥，就分享到這兒瞭。所以留個課後思考，用96孔板做細胞毒實驗，應該怎麼加藥幹預呢？

利益聲明：

本教程未涉及任何商業推廣，所用試劑、耗材可根據各課題組需求酌情更換。

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