01、什么是点突变

突变是指在PCR 过程中通过堿基错配从而引起蛋白质氨基酸的改变；

定点突变是指在DNA片段的特定位点引入堿基改变，或片段的插入以及删除。定点突变能迅速、高效的提高DNA所表达的目的蛋白的性状及表征，是基因研究工作中一种非常有用的手段。

02、定点突变的应用

蛋白质相互作用

受体或配体结合结构域的界定；蛋白质相互作用结构域的鉴定

蛋白质结构、功能

通过改变密码子偏性以提高表达水平，改变蛋白质活性，改变蛋白抗原性、稳定性和溶解性，改变酶的特异性，或许以及动力学特性，增加标签等

DNA 元件

启动子或增强子，载体创建

03、定点突变的原理

04、定点突变的流程

1. 在dam+ 阳性的宿主菌E. coli.增殖获得甲基化的模板DNA

2. 设计2条互补匹配的、突变位点居中央的突变引物

3. 加入反应组分如buffer、 template、dNTP、complementary mutagenic primers、QuikSolution&QuikChange Lightning Enzyme

4. 运行反应

5. Dpn I 消化甲基化的模板

6. 转化感受态细胞、铺板筛选

7. 提取 DNA、测序鉴定

05、多点突变与随机突变

多位点定点突变，随机突变，以及高通量突变技术；

06、推荐试剂盒