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最近發現很多新來的檢測員,在使用移液槍時,存在較大的問題。移液槍已經逐漸取代瞭我們日常實驗中使用的移液管,但是移液槍和移液管一樣,同樣有非常多的使用註意事項,隻有正確的使用移液槍才能有效保障檢測結果的準確性。接下來給大傢介紹一下移液器的使用方法和註意事項。
01
移液槍的結構和種類
移液槍有兩種類型的結構,不過經常用的和見得就是下面的這種類型的移液槍,空氣墊加樣器,外觀結構見下圖:
可通過配置的槍頭完成移液的操作,一般操作比較簡單,除瞭移液操作,移液槍校準我們也會用到。
移液槍還可以分為單通道的和多通道的移液槍,多通道的移液槍可以減少重復性工作的工作量。目前還有一些電子取樣器和分配器等改進的移液器。
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電子移液器具有穩定性高,平行性好等優點,但是我們接下來介紹的操作方式和註意事項,還是針對我們常規的移液器。
02
移液槍的使用方法
移液器的作用就是移液,移液的基本操作可以總結為以下六個步驟。
移液八部曲:移液器情況檢查;設定容量值;裝槍頭;預洗槍頭;吸液;排液;退槍頭;移液器清理歸位。
▼移液槍狀況檢查
很多資料上都是寫的移液器操作六部曲,但是我們認為,使用移液器首先要做的就是移液器的狀況檢查。檢驗內容可參考:刻度是否在正確位置,如果上次使用完,未調整到正確位置,就需要提醒,甚至需要重新校驗;驗證移液槍吸取的精度,經常使用移液器,都會大概知道液位的位置,要細心觀察,當然可以進行精度檢驗;觀察移液槍是否漏液的情況,對於老舊的移液器就要註意槍頭和移液器結合不緊密,導致滴液的問題;另外試用一下移液器,感覺移液器吹吸是否正常,比如有出現移液器反彈不夠利索,那就是出問題瞭;檢查移液器和槍頭接觸位置是否滿足你的要求,特別是在做微生物無菌操作的情況下。
再次強調移液器狀況檢查的重要性,拿一個不準確的移液器去做實驗,帶給你的隻能是不準確的結果。
▼設定容量值
選定正確的移液器,在吸頭最大量程的35-100%范圍內操作可提高操作準確性與重復性。
在調節槍的過程中切忌超過最大或最小量程,以免損害移液槍的精確度。
避免“機械回沖”,當由小量程調節至大量程時,朝所需量程方向連貫旋轉,旋轉到達超過所需量程1/3圈處再回調至所需量程,這樣可避免“機械回沖”,確保更高準確性。當由大量程調節至小量程時,直接連貫旋轉至所需量程
▼裝槍頭
正確的方法是將移液槍(器)垂直插入槍頭中,稍微用力左右微微轉動即可使其緊密結合,不要過於用力。
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在將槍頭(pipette tips)套上移液槍時,很多人會使勁地在槍頭盒子上敲幾下,這是錯誤的做法,因為這樣會導致移液槍的內部配件(如彈簧)因敲擊產生的瞬時撞擊力而變得松散,甚至會導致刻度調節旋鈕卡住。
▼預洗
用同一樣品重復吸液排液二至三次。對於微量移液器,該操作有助於內壁吸附,並且可以使大量程吸頭內部的空氣等於樣品溫度,保證操作的一致性。
註意高溫或者低溫液體請不要潤洗,溫度對槍頭的內部表面積會有影響,影響槍頭的牢固程度和槍頭吸附液體的量,影響精度。
有機液體和高揮發性液體,由於其揮發會在套筒內形成負壓,從而產生漏液的情況,因此要增加預洗的次數至六次,使得套筒內氣體飽和,避免漏液。
粘稠液體,預洗要慢,要保證預洗達到實際吸取液體的位置。
▼吸液
吸取液體時註意以下幾點即可:速度適宜,減少槍頭外壁沾有液體的量,是否有空氣。
速度不能過快,過快就會吸入空氣,過快你還需要等待(特別是對於粘稠的液體),或導致吸取不準確,吸取過快還容易導致液體進入移液器內部,特別是酸堿性物質,會損壞移液器。
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減少槍頭外壁沾有液體的量,進入液體內的深度要合適,不同的情況,並不相同,有時候沾有過多的液體,可以通過移液器和器皿壁的結合,來減少誤差,對於對平行線要求較高的,微量移液操作,就要非常註意外壁沾取液體對實驗的影響,在規范操作的前提下,維持操作的一致性。
移液器在吸取液體後,不要傾斜,防止液體進入移液器內部。
▼放液
看瞭一些放液操作的介紹,其實我們認為,放液的核心就有一點:保證你吸取的液體全部進入你的體系內,並且每次的操作都是一致的。比如有人說槍頭緊貼器壁放液,這對於小體積進入大容器就是非常不可取的。因此放液沒有固定的什麼方法,需要自己根據不同的情況去區別對待。
▼退槍頭
槍頭不要亂扔, 避免其進入下水道。
▼清理歸位
對照前面移液器的狀況檢查,在使用完移液器後,要將移液器調回最大量程,檢查移液器是否有污染物進入,並及時清理,將移液器放在合適的位置,避免損壞。
03
移液槍其他使用註意事項及維護
1.濃度和粘度大的液體,會產生誤差,為消除其誤差的補償量,可由試驗確定,補償量可用調節旋鈕改變讀數窗的讀數來進行設定。
2.可用分析天平稱量所取純水的重量並進行計算的方法,來校正取液器,1ml蒸餾水20℃時重0.9982g。
3.移液器嚴禁吸取有強揮發性、強腐蝕性的液體(如濃酸、濃堿、有機物等)。
4.嚴禁使用移液器吹打混勻液體,雖然有時候我們經常這樣做,那就要避免液體進入槍體內。
5.移液槍必須按要求定期進行校準。
6.定期清理
移液器的矯正和維修請專業人士來幹,當然你也可以自己成為專業人士。
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